原理
根据叶中脉两侧结构及生理功能的相似性，可以先剪下半叶置于暗中，剩下的半叶待进行一定时间的光合作用后，有干物质积累，在隔断光合产物往外运输的情况下（即杀死韧皮部又不损伤木质部使水分等供应正常进行），再测定半叶的干重，二者之差为被测叶片在该时间内光合作用产物的积累量。
材料与仪器
棉花 大豆
三氯乙酸
剪刀 打孔器 烧杯 天平 脱脂棉 纸牌 玻棒 称量瓶
三氯乙酸
剪刀 打孔器 烧杯 天平 脱脂棉 纸牌 玻棒 称量瓶
步骤
1．选材：在田间选取生长状况较一致的棉花植株，在每株上选取部位对称性良好，厚薄均匀的无病虫害的功能叶片，依次编号挂牌。
2．处理：在选定的叶片基部进行处理，以破坏韧皮部而保留木质部，使叶片依靠木质部得到足够的水分，同时光合产物又运不出去。
（1）环剥法：用刀片将叶柄的外皮环剥半厘米左右（适于韧皮部较厚且易剥离的植物）。
（2）抑制法：用棉球浸上5％三氯乙酸在叶柄基部涂一圈。
（3）烫伤法：用棉花球在90℃以上的开水中浸一浸，然后在叶柄基部烫一分钟，如果有明显的水浸状表示烫伤完全。对于韧皮部较薄，木质部不坚硬的植物用烫伤法好。但烫伤程度不易掌握，因此以蛋白沉淀剂三氯乙酸处理为宜。为了不改变叶片角度还可以用锡纸或塑料管包围之。
3．剪取样品：叶片基部处理完毕后，即可剪取样品，记录时间，按顺序依次剪下半叶（主脉不剪下），按编号顺序夹于湿润的纱布中，贮于暗处。过四、五小时后，再依次剪下另半叶，同样按编号夹于湿润纱布中，两次剪叶的顺序一致，使各叶片经历相等的照光时数。
4．称重比较：将各同位叶片的两半对应部位迭在一起，在无粗叶脉处放入已知面积的模板，用刀片沿边切下两个叶块，分别置于照光及暗中的两个称量瓶中，或用打孔器（已知直径），在叶片上钻取20－40片园片（尽量少带叶脉），分别于照光和暗中的两个称量盒中，在105℃下烘10分钟以杀死细胞，然后降到70－80℃烘3－4小时，至恒重为止。拿出铝盒在干燥器中冷却后，方可称重。（准确到1mg）。
2．处理：在选定的叶片基部进行处理，以破坏韧皮部而保留木质部，使叶片依靠木质部得到足够的水分，同时光合产物又运不出去。
（1）环剥法：用刀片将叶柄的外皮环剥半厘米左右（适于韧皮部较厚且易剥离的植物）。
（2）抑制法：用棉球浸上5％三氯乙酸在叶柄基部涂一圈。
（3）烫伤法：用棉花球在90℃以上的开水中浸一浸，然后在叶柄基部烫一分钟，如果有明显的水浸状表示烫伤完全。对于韧皮部较薄，木质部不坚硬的植物用烫伤法好。但烫伤程度不易掌握，因此以蛋白沉淀剂三氯乙酸处理为宜。为了不改变叶片角度还可以用锡纸或塑料管包围之。
3．剪取样品：叶片基部处理完毕后，即可剪取样品，记录时间，按顺序依次剪下半叶（主脉不剪下），按编号顺序夹于湿润的纱布中，贮于暗处。过四、五小时后，再依次剪下另半叶，同样按编号夹于湿润纱布中，两次剪叶的顺序一致，使各叶片经历相等的照光时数。
4．称重比较：将各同位叶片的两半对应部位迭在一起，在无粗叶脉处放入已知面积的模板，用刀片沿边切下两个叶块，分别置于照光及暗中的两个称量瓶中，或用打孔器（已知直径），在叶片上钻取20－40片园片（尽量少带叶脉），分别于照光和暗中的两个称量盒中，在105℃下烘10分钟以杀死细胞，然后降到70－80℃烘3－4小时，至恒重为止。拿出铝盒在干燥器中冷却后，方可称重。（准确到1mg）。
常见问题
设上午取的暗中的叶片重a毫克，经历光合作用后为b毫克，取样面积为A cm 2，照光时间为t，则总光合速率为
来源：丁香实验
