光合强度的测定实验

改良半叶法是将植物对称叶片的一部分遮光或取下置于暗处，另一部分则留在光下进行光合作用，过一定时间后，在这两部分叶片的对应部位取同等面积，分别烘干称重，因为对称叶片的两对应部位的等面积的干重原来相等，光照后叶片重量超过暗中的叶重、超过部分即为光合作用产物的重量，并通过一定的计算可得到光合作用强度。

二、仪器药品

剪刀                                   分析天平

称量皿                                 烘箱

刀片                                   金属模板

纱布                                   锡纸

三氯乙酸

三、实验步骤

1．选择测定样品

在田间选择有代表性的植株叶片（如叶片在植株上的部位、叶龄、受光条件等）20片，用小纸牌编号。

2．叶子基部处理

为了不使选定叶片中光合作用产物往外运而影响测定效果的准确性可采用下列方法进行处理。

（1）可将叶片输导系统的韧皮部破坏。如棉花等双子叶植物的叶片可用刀片将叶柄的韧皮部环割0.5厘米左右宽。

（2）如小麦、水稻等单子叶植物，由于韧皮部和木质部难以分开处理，可用刚在开水中浸过的纱布或棉花做成夹子在叶子基部烫伤一小段即可（一般90℃以上的开水烫20秒）。

（3）由于棉花叶柄木质化程度低，叶柄易受折断。用开水烫又难以掌握烫伤的程度，往往不是烫得不够便是烫得过重使叶片下垂、改变了叶片的角度。因此可改用化学方法来处理，选用适量浓度的三氯乙酸点涂叶柄以阻止光合产物的输出。三氯乙酸是一种强烈的蛋白质沉淀剂，渗入叶柄后可将筛管生活细胞杀死而起到阻止有机物质运输的作用。三氯乙酸的浓度视叶柄幼嫩的程度而异，以能显著灼伤叶柄而又不影响水分供应，不改变叶片角度为宜。一般使用5%的三氯乙酸。为了使烫后或环割等处理后的叶片不致下垂影响叶片的自然生长角度可用锡纸或塑料管包围之，使叶片保持原来生长角度。

3．剪取样品

叶基部处理完毕后，即可剪取样品，记录时间，开始进行光合作用测定。一般按编号次序分别剪下对称叶片的一半（主脉不剪下），按编号顺序夹于湿润的纱布中，贮于暗处。过四、五小时后，再依次剪下另外半叶，同样按编号夹于湿润纱布中，两次剪叶的速度应尽量保持一致，使各叶片经历相等的光照时间。

4．称重比较

将各同号叶片两半按对应部位迭在一起，在无粗叶脉处用已知面积的打孔器取小圆叶片数个分别置于光照及暗中的两个称量皿中，在80-90℃下烘至恒重（约5小时），在分析天平上称重比较。

5．计算结果

叶片干重差之总和（以mg表示）除以叶片面积（换成dm2，1dm2=100cm2）及光照时数，即得光合作用强度，以干物质mg/dm2·h表示之。计算公式如下：

由于叶片内贮存的光合产物一般为蔗糖和淀粉等，可将干物质重量乘系数1.5，得二氧化碳同化量，单位为CO₂mg/dm²·h。