原理
DNA 分子中2-脱氧核糖残基在酸性溶液中加热降解, 产生2-脱氧核糖并形成ω-羟基-γ-酮基戊醛, 后者与二苯胺试剂反应生成蓝色化合物, 其反应为：
蓝色化合物在595 nm 处有最大吸收峰, 且DNA 在40～400 μg 范围内时, 光密度与DNA 浓度呈正比。在反应液中加入少量乙醛, 可以提高反应灵敏度。
材料与仪器
蛋白质
小牛胸腺DNA NaOH 二苯胺 纯冰醋酸 过氯酸 乙醛
试管 吸量管 容量瓶 722 分光光度计
小牛胸腺DNA NaOH 二苯胺 纯冰醋酸 过氯酸 乙醛
试管 吸量管 容量瓶 722 分光光度计
步骤
1. 标准曲线的绘制: 取干燥试管6 支, 编号, 按下表加入试剂。
加完后混匀, 于60 ℃恒温水浴中保温1 h , 冷却后于595 nm处比色测定, 以零号管调零点。以DNA 浓度为横坐标, 光密度为纵坐标, 绘制标准曲线。
2. 样品测定: 取试管3 支, 两支为样品管, 一支为对照管。对照管操作与标准曲线零号管相同。向每支样品管加2.0 ml 样品液及4.0 ml 二苯胺试剂, 60 ℃ 保温1 h , 冷却后于595 nm 处比色测定, 以对照管调零点。根据测得的光密度值从标准曲线上查出相应光密度的DNA 含量, 按下式计算DNA 百分含量。
来源：丁香实验
