材料与仪器
大鼠
氯化筒箭毒碱 氯化琥珀酰胆碱 溴化新斯的明 乌拉坦 盐酸普鲁卡因 生理盐水
Powerlab 主机 刺激器 张力换能器 手术器械 棉线 橡皮泥 大头钉 铁架台
步骤
1. 安装并设定 Powerlab 记录肌张力的Chart 设置文件;调定刺激器有关参数(刺激强度2 V 左右,刺激间隔990ms,波宽4 ms);
2. 大鼠称重,麻醉;20%乌拉坦腹腔注射(1.2~1.5 g/kg)。数分钟后翻正反射消失,即可进行实验;
3. 分离坐骨神经:在髋关节后,坐骨结节内侧凹陷处切开皮肤,钝性分离肌肉,暴露出一段坐骨神经(粗大白色神经),用浸有普鲁卡因的棉线,围绕坐骨神经打一个结,在坐骨神经干上做传导阻滞麻醉,排除下行干扰。
4. 分离腓神经:在膝关节外侧,剪开皮肤,钝性分离肌肉组织,分离腓神经(位置较浅,很细,在横向与斜向纤维之间,向外下方走行。深层为胫神经,不可误认),神经穿线备用(以备在此安装刺激电极,进行刺激实验)。
5. 分离胫前肌:将大鼠两前肢固定在手术台上(仰卧),从后肢踝关节正前方向上剪开小腿皮肤,剪断踝关节前部横韧带,分离胫前肌肌腱,沿胫骨分离胫前肌(注意不要损伤血管),在踝部的胫前肌肌腱处扎线,于结扎线远端切断肌腱。
6. 连接仪器:手术操作完成后,将胫前肌与Powerlab 的拉力换能器相连接,腓神经处安放刺激电极。最适前负荷设定为10 g 左右。稳定一段时间后,于给药前记录一段正常的肌肉收缩曲线。
7. 给药1:腹腔注射tubocurarine 0.2 mg/kg体重(0.005% tub,0.4 ml/100 g 体重),待收缩振幅被抑制了20%时(以正常振幅为M,可由计算机显示屏上实时观察收缩振幅相对于M 点的变化情况。也可以拉开左侧窗口,进行对比观察),立即由舌静脉匀速注射neostigmine 0.1 mg/kg体重(0.01%Neo,0.1 ml/100 g 体重)。(注意在给药时加注Comment)
8. 给药2:肌肉收缩恢复后,腹腔注射Succinylcholine 1.2~2.4 mg/kg体重(0.03%Suc,0.4~0.8 ml/100 g 体重),待收缩振幅被抑制了20%时,立即由舌静脉匀速注射 Neo0.1 mg/kg体重(0.01%Neo,0.1 ml/100g 体重)。
9. 对所记录的胫前肌收缩图形进行分析,讨论分析结果。
来源:丁香实验