原理
一、标本采集
支原体常侵及人和动物的粘膜表面，一般可用棉花拭子涂抹取样后放入2~3 ml支原体液体培养基的小管中，或取其分泌液，若标本是组织块，可在灭菌乳钵或玻璃匀浆后接种，取样后应尽快接种培养。
二、分离培养
混种法：在制备半固体培养基时，培养基加热溶化，温度降至50℃时，添加动物血清、酵母浸液及青霉素后混匀，待冷却至37~40℃时，用无菌滴管吸取标本0.5~1 ml加入培养基中，充分混匀，凝固后置37℃孵育。
三、结果观察
绝大多数支原体为兼性厌氧，少数在含10% CO2和相对湿度80~90%的大气环境中生长良好。支原体生长缓慢，多数于3~4 d长出菌落，少数于1~2 w方长出典型菌落，在平皿固体培养基上生长的菌落呈"油煎蛋"状，边缘不整齐。
材料与仪器
肺炎支原体
糖酵解培养基 基础培养基 牛血清 酵母浸液 酚红 醋酸铊 青霉素
培养皿 烧杯 玻璃棒 天平 移液管 离心机 棉花拭子 培养箱
糖酵解培养基 基础培养基 牛血清 酵母浸液 酚红 醋酸铊 青霉素
培养皿 烧杯 玻璃棒 天平 移液管 离心机 棉花拭子 培养箱
步骤
常见问题
一、附录
糖酵解培养基（肺炎支原体培养基）
基础培养基 70 ml
马（或牛血清） 20 ml
25%酵母浸液 10 ml
0.4%酚红 0.5 ml
1%醋酸铊 2.5 ml
青霉素10000 IU/ml 5.0 ml
调pH 7.8
来源：丁香实验
