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感受态制备

最新修订时间:

材料与仪器

大肠杆菌
CaCl2 水
震荡仪 三角瓶 试管 离心管 离心机

步骤

1、取1%大肠杆菌E.coli接种于含2 ml LB培养基的试管中,37 ℃振荡培养过夜。
 
2、取0.1ml过夜培养物转种于含10 ml LB培养基的三角瓶中,37 ℃振荡培养3h至OD600=0.3。
 
3、然后把培养物倒入1.5 ml离心管中,冰浴10min。
 
4、在4 ℃下以4000 rpm离心5min,去上清液。
 
5、把菌体悬浮于15 ml冰冷的0.1M CaCl2溶液中,置冰上30min
 
6、然后再在4 ℃下以4000 rpm离心10min,去上清液。
 
7、将菌体悬浮于0.1 ml CaCl2溶液中,冰浴放置4-12hr备用。

来源:丁香实验

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