感受态制备
最新修订时间：
材料与仪器
大肠杆菌
CaCl2 水
震荡仪 三角瓶 试管 离心管 离心机
CaCl2 水
震荡仪 三角瓶 试管 离心管 离心机
步骤
1、取1%大肠杆菌E.coli接种于含2 ml LB培养基的试管中，37 ℃振荡培养过夜。
2、取0.1ml过夜培养物转种于含10 ml LB培养基的三角瓶中，37 ℃振荡培养3h至OD600=0.3。
3、然后把培养物倒入1.5 ml离心管中，冰浴10min。
4、在4 ℃下以4000 rpm离心5min，去上清液。
5、把菌体悬浮于15 ml冰冷的0.1M CaCl2溶液中，置冰上30min
6、然后再在4 ℃下以4000 rpm离心10min，去上清液。
7、将菌体悬浮于0.1 ml CaCl2溶液中，冰浴放置4-12hr备用。
来源：丁香实验
