正反交法

自由组合定律的实质是基因的分离是独立的，而在配子中非等位基因自由组合，产生四种比例相同的配子。因此在杂种二代会出现四种表型，比例为9：3：3：1。这一实验是利用果蝇的两对相对性状：长翅与残翅、黑檀体与灰体且分别位于不同染色体上这一特征进行的长翅灰体×残翅黑檀体的双因子杂交实验，旨在验证自由组合定律。

果蝇的灰体(E)与黑檀体(e)为一对相对性状,决定这对性状的基因位于第Ⅲ染色体上;长翅(Vg)与残翅(vg)为另一对相对性状,决定这对性状的基因位于第Ⅱ染色体上。

1.选灰体残翅果蝇为母本,黑檀体长翅为父本(反交也可,但因残翅果蝇不能飞,只能爬行,用做母本比较好)。雌蝇一定要选处女蝇,可在实验前2～3d陆续收集,雌、雄个体分开培养 , 数目多少根据需要而定。

2. 首先把灰体残翅处女蝇倒出麻醉 , 挑 5 只移到水平放置的杂交瓶中 , 再把 黑檀体长翅倒出麻醉 , 挑选 5 只雄蝇 , 移到上述杂交瓶中。 等 杂交 亲本在杂交 瓶中全部苏 醒后 ,将杂交瓶直立 , 并移入 25℃ 温箱中培养。 注意贴好标签 ( 写明亲本基因型、交配方式、杂交日期、实验者姓名)。

3. 7d 后 , 释放杂交亲本。

4. 再过 4～5d, F1 成蝇开始出现 , 观察 F1性状 , 连续检查 2～3d, 或在释放亲本7d后集中观察。

5. 选取 5～10 对 F1 雌、雄果蝇 , 移入一 新培养瓶 ( 这里不需用处女蝇) , 置 25℃ 温箱中培养。

6. 7d 后 , 释放 F1 亲本。

7.再过4～5d,F2成蝇出现,开始观察。可连续统计7～8d。被统计过的果蝇倒入水槽冲掉。

8.观察并统计F1代的表型及个体数,分析相对性状间的显隐性关系。观察并统计F2代的表型及各种表型的个体数,特别要注意新性状组合个体的出现。计算不同表型个体数的比例,确定这两对基因的遗传规律。