原理
小鼠的足底无毛,皮肤裸露,在温度55±0.5℃的金属板上产生疼痛反应,表现为舔后足,踢后腿等现象。哌替啶(度冷丁)可提高痛阈,推迟小鼠疼痛出现时间。
材料与仪器
小鼠
哌替啶溶液 乙酰水杨酸溶液 生理盐水 苦味酸溶液
恒温水浴箱 热板槽 大烧杯 天平 鼠笼 注射器 秒表
哌替啶溶液 乙酰水杨酸溶液 生理盐水 苦味酸溶液
恒温水浴箱 热板槽 大烧杯 天平 鼠笼 注射器 秒表
步骤
一、方法
⒈ 将恒温水浴箱内加水至没过烧杯底部1 cm,调节水温至55±0.5 ℃。
⒉ 筛选并测定正常痛阈将小鼠放入烧杯内立即用秒表记录时间,密切观察小鼠反应,以舔后足为痛觉指标。记录痛阈时间值(从小鼠放入热板烧杯内到出现舔后足)。每只小鼠测痛阈2 次(间隔3 min),取其平均值为正常痛阈(药前痛阈s)。凡在30 s内不舔后足或痛阈小于10s者弃去,每实验小组筛选合格小鼠9只,并用苦味酸标记编号。
⒊ 分组将9只小鼠随机分为甲、乙、丙3 组。
⒋ 给药各组的动物注射下列药品0.1 ml/kg,并记录给药时间。甲组用0.2%哌替啶溶液(50 mg/kg);乙组用0.4%乙酰水杨酸溶液(400 mg/kg);丙组用生理盐水。
⒌ 测痛阈变化值给药后15、30、45 min各测痛阈1 次,对60 s内不舔足的小鼠应立即取出来,痛阈按60 s计算。
二、结果
⒈ 综合全实验室数据,计算出各组痛阈的平均值(X)填入下表
⒉ 计算各组动物用药后15、30、45 min时的痛阈提高百分率(P)
⒊ 以时间(min)为横坐标,痛阈提高百分率为纵坐标,绘制各组的时-效曲线。
注意事项
⒈ 本实验应选用雌性小鼠,雄性小鼠遇热时阴囊松弛下垂,与热板接触影响实验结果。
⒉ 室温应控制在13±18 ℃,此温度小鼠对痛反应较稳定。
⒊ 正常痛阈≥30 s、≤10 s以及喜跳跃的小鼠均应弃用。
⒋ 测痛阈时若60 s仍无反应,应立即取出小鼠,以免烫伤足趾,且痛阈按60 s计。
来源:丁香实验