原理
青蛙的心脏离体后,把含有任氏液的蛙心套管插入心室,用这种人工灌流的方法保持心脏新陈代谢的顺利进行,以维持蛙心有节律地收缩和舒张。通过生物信号处理系统,记录心脏搏动情况。本实验采用离体蛙心,观察强心苷的强心作用。
材料与仪器
青蛙
洋地黄溶液 任氏液 无钙任氏液 氯化钙溶液
生物信息处理系统 张力传感器 蛙板 探针 锥子 手术器材 注射器 蛙心套管 蛙心夹 双凹夹 铁架 万能杠杆
洋地黄溶液 任氏液 无钙任氏液 氯化钙溶液
生物信息处理系统 张力传感器 蛙板 探针 锥子 手术器材 注射器 蛙心套管 蛙心夹 双凹夹 铁架 万能杠杆
步骤
一、方法
⒈ 离体蛙心的准备(如图6-1)
⒈ 离体蛙心的准备(如图6-1)
⑴破坏大脑、脊髓,仰位固定于蛙板上。
⑵剪开胸廓、心包膜暴露心脏,结扎右主动脉(A),于左主A穿线备用。
⑶于左主A 剪一“V”形小口,将有任氏液的蛙心套管插入,并在心脏收缩时通过主A 球,转向左后方插入心室,见到套管内的液面随着心搏上下波动后,将松结扎紧并固定在套管的小钩上。用滴管吸去套管内血液,,换2~3 次任氏液洗净余血,以防止血块堵塞套管。剪断主动脉,持套管提起心脏,自静脉窦以下把其余血管一起结扎(切勿伤及或结扎静脉窦),分离周围组织,在结扎处下剪断血管,离体出心脏。再用任氏液连续换洗,至无血色,使插
管内保留1.5ml 左右的任氏液。
图 6-1straub 法插管插入要点示意图(a)和(b)装置
⒉ 实验装置的准备
⑴将蛙心套管固定于铁架台,用带有长线的蛙心夹在心舒期夹住心尖部,将长线连于张力换能器。
⑵打开电脑及BL-420系统→输入信号或实验项目→循环实验(C)→蛙心灌流⑴。
⑶开始实验(此时启动自动记录)→速度调节为4 或8s/dir→记录正常曲线,张力调至0.5~1 g。(实验过程不要随意点击记录的红色圆点,否则会中断记录)。
⒊ 按下列顺序给药
⑴描记一段正常曲线。
⑵用滴管吸出套管内任氏液,换成等容积无钙任氏液,观察曲线有何变化。
⑶当心脏收缩显著减弱时,向套管内加入1:500 洋地黄毒苷0.2 ml,如作用不明显,再加入1:250 洋地黄毒苷0.2 ml。
⑷当作用明显时,再向套管内加入1%氯化钙溶液2—3 滴。比较每次加药后心脏收缩的振幅和频率。
⒋ 实验结束单击“■”停止试验→输文件名→保存→反演→压缩→图形剪辑。
⒌ 相关内容设置(S) 实验标题(H)→实验人员(P)→实验相关数据(R)。
⒍ 打印设置文件→打印预览(V)→4 张/组→打印设置(R)→属性(P)→自定义(S)
省墨→打印(P)→打印份数(C)。
二、结果
进行图形分析。
进行图形分析。
注意事项
⒈ 本实验以青蛙心脏为好。因蟾蜍皮下腺体有强心苷样物质,可降低对强心苷的敏感性。
⒉ 蛙心套管一定要插入心室。切勿用力过大,插入过深,损伤心肌。
⒊ 结扎静脉时,要远离静脉窦(起博点)。
⒋ 换液时,任氏液的量要恒定,注意避免空气进入心脏。加药时用吸管充分混匀。
⒌ 在整个实验过程中应保持套管内液面高度不变,以保证心脏固定的负荷。
⒍ 在实验过程中,基线的位置、放大倍数、描记速度应始终一致。
⒉ 蛙心套管一定要插入心室。切勿用力过大,插入过深,损伤心肌。
⒊ 结扎静脉时,要远离静脉窦(起博点)。
⒋ 换液时,任氏液的量要恒定,注意避免空气进入心脏。加药时用吸管充分混匀。
⒌ 在整个实验过程中应保持套管内液面高度不变,以保证心脏固定的负荷。
⒍ 在实验过程中,基线的位置、放大倍数、描记速度应始终一致。
常见问题
一、强心苷对心脏有什么作用?
二、由实验结果分析强心苷的作用特点。
二、由实验结果分析强心苷的作用特点。
来源:丁香实验