原理
动物的离体肠肌在适宜的营养液环境中,仍具有兴奋和收缩等特性。由于肠肌上分布有M 受体、α受体和β受体等,当向营养液中加入Ach(N,M 受体激动药)、阿托品(M 受体阻断药)、毛果芸香碱(M受体激动药)、肾上腺素(α、β受体激动药)及新斯的明(抗胆碱酯酶药)等药物时,可与相应的受体结合,激动或阻断相应的受体,引起肠肌收缩或松弛。氯化钡是一种非受体作用的有毒化合物,对肠肌有直接的兴奋收缩作用,常用于药理实验中。
材料与仪器
家兔
台氏液 氯化乙酰胆碱溶液 硫酸阿托品溶液 硝酸毛果芸香碱溶液 盐酸肾上腺素溶液 盐酸普萘洛尔溶液 溴化新斯的明溶液 氯化钡溶液
生物信号处理系统 恒温水浴灌流泵 张力换能器 铁支架 离体器官灌流浴槽 L形通气管 气泵 小烧杯 大烧杯 注射器 培养皿 手术线 持针器 手术针 镊子 记号笔
台氏液 氯化乙酰胆碱溶液 硫酸阿托品溶液 硝酸毛果芸香碱溶液 盐酸肾上腺素溶液 盐酸普萘洛尔溶液 溴化新斯的明溶液 氯化钡溶液
生物信号处理系统 恒温水浴灌流泵 张力换能器 铁支架 离体器官灌流浴槽 L形通气管 气泵 小烧杯 大烧杯 注射器 培养皿 手术线 持针器 手术针 镊子 记号笔
步骤
一、步骤
⒈ 家兔1只,击头致死,立即剖腹,轻轻剪下空肠和回肠上半段,浸入冷台氏液中,将肠系膜沿肠壁分离掉,用台氏液把肠内容物冲洗干净,将肠剪成2~2.5 cm 长的肠段备用,如不立即使用,可将肠段放入台氏液,置于冰箱中保存,一般可保持活力在12 小时左右。
⒉ 实验前,先调好恒温装置,温度保持在37~38 °C,在浴槽中装入台氏液,并标记好液面高度。经气泵注入空气(每秒1~2 个气泡)。
⒊ 启动BL-420 生物信号处理系统,连接张力换能器于相应通道,将张力换能器固定于铁支架上。
⒋ 取肠管一段,两端穿线,一端固定于通气管的小钩上,放入浴槽中,另一端连接在张力换能器上。待离体肠段稳定5~10 min后,调试BL-420生物信号处理系统:设置增移、速度、打印通道、屏幕及曲线色彩等。
⒌ 进入记录状态:描记一段正常收缩曲线,继而依次向浴槽中加药物进行实验。
注意:每加入一次药液,至作用明显后,用台氏液连续冲洗3 次,等到曲线恢复到用药前的水平,随之描记一段基线,再加入下一个药液。如果肠管反应已失灵,可更换一段肠管。
①0.001%Ach溶液0.2 ml,当肠肌活动曲线降至基线时,连续冲洗3次。
②重复①,作用达最高点时再加0.1%阿托品0.2ml,记录曲线变化后连续冲洗3次。
③加1%氯化钡1.0ml,作用达高峰时立即加入0.1%阿托品1.0ml,记录曲线变化。
④待肠肌活动稳定后加入0.1%毛果芸香碱0.5ml,观察描记肠肌活动曲线后连续冲洗3次。
⑤加0.1%阿托品0.5ml,作用明显时再加0.1%毛果芸香碱0.5ml,观察描记肠肌活动曲线后连续冲洗3次。
⑥加0.01%肾上腺素0.5ml,观察描记肠肌活动曲线后连续冲洗3次。
⑦加0.3%普萘洛尔0.5ml,接触2~3min 后,再加0.01%肾上腺素0.5ml,观察描记肠肌活动曲线后连续冲洗3次。
⑧加0.05%新斯的明0.5ml,观察描记肠肌活动曲线
二、结果打印出实验曲线,并对曲线进行讨论。
注意事项
1. 实验用动物在实验前24 h 禁食,但不禁水,以保持肠腔无粪便。
2. 培养皿中的台氏液温度保持在37~38 °C,否则将影响肠肌活动。
3. 每给1 次药物后,均要用台氏液冲洗3 次,每次进液保留时间≥1 min。
常见问题
一、哪些传出神经药物对肠肌活动有明显影响?叙述其作用机制及临床意义。
来源:丁香实验