原理
水中细菌总数测定是测定水中需氧菌、兼性厌氧菌和异养菌的总数。水中细菌总数可作为判定被检水样被有机物污染程度的标志,细菌数量越多,则水中有机质含量越大。本实验应用平板计数技术测定水中细菌总数。以1 ml水样在营养琼脂培养基中,于37 ℃培养24 h后所生长的细菌菌落的总数,作为水体受细菌污染程度的标志,我国规定1 ml自来水中细菌总数不得超过100个。
材料与仪器
水 牛肉膏蛋白胨琼脂培养基
牛肉膏 蛋白胨 氯化钠 琼脂 蒸馏水 盐酸 氢氧化钠
三角瓶 带玻璃塞瓶 培养皿 移液管 试管
牛肉膏 蛋白胨 氯化钠 琼脂 蒸馏水 盐酸 氢氧化钠
三角瓶 带玻璃塞瓶 培养皿 移液管 试管
步骤
一、水样的采集与保藏
自来水:先将自来水龙头用火焰烧灼 3 min灭菌,然后再放水5-10 min,最后用无菌容器接取水样,并速送回实验室检测。
二、水中细菌总数测定
自来水:用无菌移液管吸取1 ml水样,加入无菌培养皿中(每个水样重复3个培养皿),然后在每个上述培养皿内各加入约15 ml已融化并冷却至45-50 ℃的牛肉膏蛋白胨琼脂培养基,并轻轻旋转摇动,使水样与培养基充分混匀,冷凝后即成检测平板。然后将其倒置于37 ℃恒温箱内培养24 h。
三、计菌落数
将培养24 h的平板取出,用肉眼观察,计平板上的细菌菌落数(计数时,对那些看来相似、距离很近但不相触的菌落,应一一计数。那些紧密接触而外观相异的菌落,也一一计数)。
来源:丁香实验