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植物体内硝态氮含量的测定(植物体内硝态氮含量的测定)

最新修订时间:

原理

在浓酸条件下,NO3-与水杨酸反应,生成硝基水杨酸。生成的硝基水杨酸在碱性条件下(pH>12)呈黄色,最大吸收峰的波长为410nm,在一定范围内,其颜色的深浅与含量成正比,可直接比色测定。

材料与仪器

植物材料
硝态氮标准溶液 氢氧化钠溶液 水杨酸─硫酸溶液
分光光度计 天平 试管 吸量管 容量瓶 洗耳球 电炉 铝锅 玻璃泡

步骤

1. 标准曲线的制作

(1)吸取500mg/L 硝态氮标准溶液1ml、2ml、3ml、4ml、6ml、8ml、10ml、12ml分别放入50ml容量瓶中,用无离子水定容至刻度,使之成10、20、30、40、60、80、100、120mg/L的系列标准溶液。

(2)吸取上述系列标准溶液0.1ml,分别放入刻度试管中,以0.1ml蒸馏水代替标准溶液作空白。再分别加入0.4ml 5%水杨酸—硫酸溶液,摇匀,在室温下放置20min后,再加入8% NaOH溶液9.5ml,摇匀冷却至室温。显色液总体积为10ml。

(3)绘制标准曲线:以空白作参比,在410 nm波长下测定光密度。以硝态氮浓度为横坐标,光密度为纵坐标,绘制标准曲线并计算出回归方程。

2. 样品中硝酸盐的测定

(1)样品液的制备 取一定量的植物材料剪碎混匀,用天平精确称取材料2g左右,重复三次,分别放入三支刻度试管中,各加入10ml无离子水,用玻璃泡封口,置入沸水浴中提取30min。到时间后取出,用自来水冷却,将提取液过滤到25ml容量瓶中,并反复冲洗残渣,最后定容至刻度。

(2)样品液的测定 吸取样品液0.1ml分别于三支刻度试管中,然后加入5%水杨酸—硫酸溶液0.4ml,混匀后置室温下20min,再慢慢加入9.5ml 8%NaOH溶液,待冷却至室温后,以空白作参比,在410nm波长下测其光密度。在标准曲线上查得或用回归方程计算出硝态氮浓度。

V:提取样品液总量;

W:样品鲜重。

注意事项

“硝态氮”易溶于水,溶水后降低水温;“硝态氮”易燃、易爆、易吸潮。 许多水溶性肥料中含有硝态氮。

常见问题

“硝态氮”用于农业补充“氮”元素,使作物生长加快,延长作物生长期和采收期。作物缺“氮”果实发育不良,畸形果实较多,相应的来说硝酸钾等肥料对农作物的生长起到至关重要的作用,属于作物生长多必须的三大元素。

来源:丁香实验

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