抗坏血酸含量的测定

植物学实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

抗坏血酸即维生素 C, 广泛存在于新鲜水果、蔬菜中，它是一种高活性物质，参与很多新陈代谢活动。抗坏血酸是生物体内抗氧化体系成员之一，因此抗坏血酸含量可作为植物抗衰老和抗逆境的重要生理指标，也可作为果品质量、选育良种的鉴别指标。通过本实验掌握用分光光度计法测定植物抗坏血酸含量的方法。

原理

抗坏血酸含量的测定的基本原理是还原型抗坏血酸 (AsA) 可以把铁离子还原成亚铁离子，亚铁离子与红菲咯噂 (BP) 反应形成红色螯合物。此物质在 534 nm 波长的吸收值与 AsA 含量呈正相关，故可用比色法测定。脱氧抗坏血酸 (DAsA) 可由二硫苏糖醇 (DTT) 还原成 AsA。测定 AsA 总量，从中减去还原型 AsA, 即为 DAsA 含量。

来源：丁香实验团队

操作方法

抗坏血酸含量的测定

1. 制作标准曲线配制浓度为2mg/L，4mg/L，6mg/L，8mg/L，10mg/L，12mg/L，14mg/L的AsA系列标准液。取各浓度标准液1.0ml于试管中，加入1.0ml 5%TCA、1.0ml乙醇摇匀，再依次加入0.5ml 0.4%H3PO4－乙醇、1.0ml 0.5%BP－乙醇、0.5ml 0.03%FeCl3－乙醇，总体积5.0ml。将溶液置于30℃下反应90min，然后测定A