基因互补实验

遗传学实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

基因是生物遗传物质的最小功能单位,基因是可分的。要确定一个基因的界限,不能依赖不同突变型之间的重组频率,而必须进行功能分析。通过突变体的互补作用进行互补测验来确定基因的界限。

所谓互补作用是指两个突变型染色体同处于一个细胞,由于相对应野生型基因的互相补偿而使其表型正常化的作用。如果说重组是DNA分子之间直接相互作用的话,那么互补则是在基因表达水平上的作用。互补测验有两个基本条件:①两个突变型染色体同处在一个细胞形成二倍体或部分二倍体;②这两个突变型染色体之间不发生重组或者只发生可忽略不计的极少重组。来源：《遗传学实验教程》

来源：丁香实验

操作方法

基本方案

1.将供体菌和受体菌分别接入5ml LB培养液中,37℃振荡培养过夜。2.按表36-1的组合将供体菌与受体菌按1∶1进行混合于无菌试管中,置37℃轻摇30min。3.将4组混合物分别稀释至10-5;各取10-4、10-5稀释液0.1ml分别涂布在含链霉素和色氨酸平板上,同时取供体菌和受体菌液0.1ml分别涂在以乳糖作为惟一碳源的基本培养基(含VB1)平板上作为对照,置37℃培养2d。4.观察平板上