动物病毒毒力测定实验

微生物实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

病毒感染能力测定是评估其毒力的常用方法之一，通常采用测定实验动物的半数致死量（50％ lethel dose，LD₅₀）和测定细胞培养物的半数组织（细胞）培养物感染量（50％ tissue culture infectious dose，TCID₅₀）来评估病毒的感染能力（毒力）。用细胞培养物测定病毒的 TCID₅₀ 较实验动物的 LD₅₀ 简便、经济，且易控制实辁条件，加之细胞系的同质性高，敏感性比较一致，沒：有个体间的遗传差异。所以本实验介绍 TCID₅₀ 的测定方法。

来源：《微生物学实验（第三版）》

来源：丁香实验

操作方法

TCID50 的测定方法

1. MDCK 细胞培养常规复苏液氮冻存的 MDCK 细胞，接种于培养方瓶中，加入 7～10 ml DMEM 培养液，充分混匀，置 37℃ 培养 2～3d，待细胞形成致密单层备用。2. 细胞悬液制备MDCK 单层细胞一瓶，弃上清液，加 0.25％胰酶 1 ml，消化 2～5 min，待细胞完全脱壁后加入 3 ml DMEM 培养液，充分分散细胞取样显微计数，调整细胞浓度为 2×105～5×105