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微生物污染的排除实验

实验分类:

微生物实验

最新修订时间:

简介

细胞受各种霉菌、细菌和支原体污染后,一般都较难排除或杀灭,其中以支原体更难排除,因此从预防着眼为上。内容来源:组织培养和分子细胞学技术。(北京出版社)

来源:丁香实验

操作方法

抗生素除菌法

最近报道应用以 4-氟,2-羟基喹啉(Ciprofloxacin:Cip)、截耳素衍生物(Pleu—romutilinDeriyative:BM—Cyclin2:BM—1)和四环素衍生物(BM-2)等三种抗生京抑制支原体效果很好,这三种抗生京单用或合用都能有效地杀灭支原体,其法如下(以BM-1和MB-2 为例) 1. 抗生素制备 均可用PBS配成250×浓缩液-20 ℃备用;

加温除菌法

根据支原体对热耐受性差的特点,有人把受污染的细胞置41 ℃中作用5~10 小时,最长可达18 小时,以杀灭支原体。

巨噬细胞吞噬法

从动物腹腔采取巨噬细胞,为排除其它细胞成分。可先进行纯化。然后再加入被支原体污染的细胞培养液中混合培养。在培养过程中,为检验支原体是否已被消除干净,可利用支持物培养法验证;取出支持物逐日染色、镜检观察,至支原体已被消除干净为止。

动物体内接种除菌法

把受支原体污染的肿瘤细胞可接种在同种动物皮下或腹腔中,借动物免疫系统消灭支原体,而肿瘤细胞却能在体内继续生长,待—定时间后,从体内取出细胞再进行培养繁殖。但此法稍繁琐,按同一原理也可在体外进行。

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