微生物的染色与形态结构观察实验

1. 涂片取两块干净的载玻片，各滴一小滴生理盐水于载玻片中央，用无菌操作，分别挑取金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌于二载玻片的水滴中（每一种菌制一片），调匀并涂成薄膜。注意滴生理盐水时不宜过多，涂片必须均匀。 2. 干燥于室温中自然干燥。 3. 固定涂片面向上，于火焰上通过2-3次，使细胞质凝固，以固定细菌的形态，并使其不易脱落。但不能在火焰上烤，否则细菌形态将毁坏。 4.

1. 涂片将培养14~16小时的枯草芽孢杆菌和培养24小时的大肠杆菌分别作涂片（注意涂片切不可过于浓厚），干燥、固定。固定时通过火焰1~2次即可，不可过热，以载玻片不烫手为宜。 2. 染色 （1）初染加草酸铵结晶紫一滴，约一分钟，水洗。 （2）媒染滴加碘液冲去残水，并覆盖约一分钟，水洗。 （3）脱色将载玻片上面的水甩净，并衬以白背景，用95％酒精滴洗至流出酒精刚

一、方法1 1. 将培养24小时左右的枯草芽孢杆菌或其他芽孢杆菌，作涂片、干燥、固定。 2. 滴加3~5滴孔雀绿染液于已固定的涂片上。 3. 用木夹夹住载玻片在火焰上加热，使染液冒蒸汽但勿沸腾，切忌使染液蒸干，必要时可添加少许染液。加热时间从染液冒蒸汽时开始计算约4~5分 钟。这一步也可不加热，改用饱和的孔雀绿水溶液（约7.6%）染10分钟。 4. 倾去染液，

1. 在载玻片一端滴一滴无菌水，取少许培养了72小时的圆褐固氮菌在水滴中制成悬液。取一滴新配好的黑色素溶液（也可用绘图墨水）与菌悬液混合，另取一块载玻片作为推片，将推片一端平整的边缘与菌悬液以30度角接触后，顺势将菌悬液推向前方，使其成匀薄的一层，风干。 2. 用纯甲醇固定1分钟。 3. 加番红液数滴于涂片上，冲去残余甲醇，并染30秒钟，以细水流适当冲洗，吸干后油镜检查，背景黑

1. 鞭毛染色 （1）菌种用新培养的菌种为宜，如所用菌种已长期未移种，则用新制备的斜面连续移种2~3次后再使用。最好是将经活化的菌种接种到新制备的琼脂斜面或半固体培养基平皿上，培养10小时左右，备用。 （2）制片在载玻片的一端滴一滴蒸馏水，用接种环挑取少许备用的菌苔，最好从菌落的边缘取菌苔，注意不要挑上培养基，在载玻片的水滴中轻沾几下。将载玻片稍倾斜，使菌液随水滴缓慢流到另