菌种保藏实验

一、将菌种接种在适宜的固体斜面培养基上，待菌充分生长后，棉塞部分用油纸包扎好，移至2-8℃的冰箱中保藏。 二、保藏时间依微生物的种类而有不同，霉菌、放线菌及有芽孢的细菌保存2-4个月，移种一次。酵母菌两个月，细菌最好每月移种一次。

一、将滤纸剪成0.5×1.2 cm的小条，装入0.6×8 cm的安瓿管中，每管1-2张，塞以棉塞，1.05 kg/cm2，121.3℃灭菌30分钟。 二、将需要保存的菌种，在适宜的斜面培养基上培养，使充分生长。 三、取灭菌脱脂牛乳1-2 ml滴加在灭菌培养皿或试管内，取数环菌苔在牛乳内混匀，制成浓悬液。 四、用灭菌镊子自安瓿管取滤纸条浸入菌悬液内，使其吸饱，

一、将液体石蜡分装于三角烧瓶内，塞上棉塞，并用牛皮纸包扎，1.05 kg/cm2，121.3℃灭菌30分钟，然后放在40℃温箱中，使水汽蒸发掉，备用。 二、将需要保藏的菌种，在最适宜的斜面培养基中培养，使得到健壮的菌体或孢子。 三、用灭菌吸管吸取灭菌的液体石蜡，注入已长好菌的斜面上，其用量以高出斜面顶端1 cm为准，使菌种与空气隔绝。 四、将试管直立，置低温

一、取河沙加入10%稀盐酸，加热煮沸30分钟，以去除其中的有机质。 二、倒去酸水，用自来水冲洗至中性。 三、烘干，用40目筛子过筛，以去掉粗颗粒，备用。 四、另取非耕作层的不含腐植质的瘦黄土或红土，加自来水浸泡洗涤数次，直至中性。 五、烘干，碾碎，通过100目筛子过筛，以去除粗颗粒。 六、按一份黄土、三份沙的比例（或根据需要而用其他比

一、准备安瓿管用于液氮保藏的安瓿管，要求能耐受温度突然变化而不致破裂，因此，需要采用硼硅酸盐玻璃制造的安瓿管，安瓿管的大小通常使用75×10 mm的，或能容1.2 mm液体的。 二、加保护剂与灭菌保存细菌、酵母菌或霉菌孢子等容易分散的细胞时，则将空安瓿管塞上棉塞，1.05 kg/cm2，121.3℃灭菌15分钟：若作保存霉菌菌丝体用则需在安瓿管内预先加入保护剂如10%的甘油蒸馏水溶

一、准备安瓿管用于冷冻干燥菌种保藏的安瓿管宜采用中性玻璃制造，形状可用长颈球形底的，亦称泪滴型安瓿管，大小要求外径6-7.5 mm，长105 mm，球部直径9-11 mm，壁厚0.6-1.2 mm。也可用没有球部的管状安瓿管。塞好棉塞，1.05 kg/cm2，121.3℃灭菌30分钟，备用。 二、准备菌种，用冷冻干燥法保藏的菌种，其保藏期可达数年至十数年，为了在许多年后不出差错，故所用菌种要特别注

1.用接种针下端挑取菌种（针必须挺直），自半固体培养基的中心垂直刺入半固体培养中，直至接近试管底部，但不要穿透，然后沿原穿刺线将针退出，塞上试管塞，烧灼接种针（培养试管选用带螺旋帽的短试管或用安瓿管等）。2. 将培养好的穿刺管盖紧，外面用石蜡膜（parafilm）封严，置 4℃ 存放。3. 取用时将接种环（环的直径尽可小些）伸入菌种生长处挑取少许细胞，接入适当的培养基中。穿刺管封严后可保留以后再用

1. 以溶液形式置低温保存DNA 溶于无菌 TE 缓冲液（10 mmol/L Tris • HCl，1 mmol/L EDTA，pH 8.0）中，其中 EDTA 的作用是整合溶液中二价金属离子，从而抑制 DNA 酶的活性（Mg2+ 是 DNA 酶的激活剂）。 TE 的 pH 为 8.0 是为了减少 DNA 的脱氨反应。哺乳动物细胞 DNA 的长期保存。可在 DNA 样品中加入 1 滴氯仿，避免细菌