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简介
为了提髙转导效率,一个叫假型形成的策略被采纳了,它是将反转录病毒颗粒与其他病毒编码的外壳蛋白相结合。因为这些假型载体颗粒用了不同的表面受体进人细胞,与含有原始的反转录病毒外壳蛋白的载体相比,它们能更有效地把转基因运输进哺乳动物细胞。如果受体有严格的组织分布,那么依靠外壳蛋白,它们也能够进行组织专一性的运输。这里,我们采用了水泡性口炎病毒(V S V ) 的糖蛋 白 (G ) 来说明如何在几天之内产生假型载体。假型慢病毒载体也通过相似的策略产生。
作者:T.弗里德曼等,译者:殷勤伟等,本实验来自「基因转移」
来源:丁香实验
操作方法
产生 VSV-O 假型化的反转录病毒载体 材料 试剂 CaCl2 2mol/L 溶解 29. 41 g 的 CaCl2 • 2 H20 到 100 ml H2O, 无菌过滤。 细胞 293T (ATCC: CRL-11268) HT1080 (ATCC: CRL-121) DMEM 含 4. 5 g/L 葡萄糖、 3. 7