哺乳动物组织的匀浆实验

方法要点：所有操作均在0〜4℃进行。①从动物中取出组织后，修剪并去除脂类和结缔组织，然后放入预冷的匀浆缓冲液A中。②用切刀把洗好的组织切成小块（如1cm方块），或者把这些组织放在绞肉机上搅两次。像肝脏、大脑、肾和心脏等组织很容易在韦林搅切器中破碎，但是骨骼肌和肺则很难，所以应在匀浆之前先用家用绞肉机来绞碎。许多纤维组织，比如哺乳动物胸腺，必须在匀浆之前冰冻以利于破碎（常用Ultra-Turrex匀

1将从结肠上刮下来的黏膜放人5倍体积的碳酸盐缓冲液（pH9.2，含抑胃肽酶和PMSF)中，使用Ultra-Turrex匀浆器匀浆。②10000g离心20min，除去组织碎片。③逐滴加入lmol/LHCl(约需100ml),缓慢（大于2h)调上清液的PH值至4.5，并不断搅动。使黏蛋白形成絮状沉淀。④4℃:条件下10000g离心20min，以除去沉淀。上清液为粗提液，可以作为纯化方案的原始材料。