Far Western 分析蛋白质相互作用实验

实验分类：

蛋白质实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

使用 Far Western blot 分析蛋白质相互作用时，目的蛋白固定在一个固体支持膜上，然后用非抗体蛋白探测。 Far Western blot 能够用于识别复杂的蛋白复合物中蛋白质的特异性相互作用。

来源于《精编分子生物学实验指南（第五版）》

来源：丁香实验

操作方法

分析蛋白质混合物

封闭缓冲液 I： 0.05%（m/V）吐温-20 溶解到 1 × PBS 缓冲液中，新鲜配置封闭缓冲液 II： 1 g 牛血清白蛋白（BSA；fraction V）溶解到 100 ml 1 × PBS ，新鲜配置1. 准备待分析蛋白样品，将之融解到 1 × SDS 上样缓冲液中。2. 用 SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离样本。3. 用半干印迹法将蛋白质从胶上转到固体支持膜上（如 PVDF 或者硝化纤