重组 MVA 活体免疫染色实验

实验分类：

蛋白质实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

活体免疫染色可用于检测改造的痘苗病毒Ankara （MVA），也可用于鉴定细胞表面或在细胞质中表达的蛋白质。当然也适用于标准痘苗病毒株。

来源《精编分子生物学实验指南（第五版）》

来源：丁香实验

操作方法

基本方案

1. 胰酶消化汇片生长 CEF 细胞，将其放入刀豆蛋白 A 包被的 6 组织培养板中培养，直到细胞生长至汇片。2. 取出转染细胞裂解液置于冰上，在杯状超声仪上以最大功率超声 30 s。分别将含有 100、10、1、0.1 μl 细胞裂解液的 2 ml 完全 MEM-2.5 培养基加入每个孔中，每种浓度重复加入两个孔中，轻轻摇晃混匀，培养 2 天。3. 用抗外源基因表达蛋白的一抗对没有进行固定的细胞