各级分蔗糖酶活性测定及纯化率的计算实验

实验分类：

蛋白质实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

用测定生成还原糖（葡萄糖和果糖）的量来测定蔗糖水解的速度，本实验中，蔗糖酶的活力单位指在一定条件下反应5 min，每产生1毫克葡萄糖所需酶量。本实验旨在测定各级分的蛋白质含量及蔗糖酶活性。

来源：丁香实验

操作方法

考马斯亮蓝法

1. 各级分Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ蔗糖酶活性测定用0.02 mol/ L, pH4.9 乙酸缓冲液(也可以用pH5～6 的去离子水代替) 稀释各级分酶液, 测出酶活合适的稀释倍数: Ⅰ : 1 000～10 000 倍 Ⅱ : 1 000～10 000 倍 Ⅲ : 100～1 000 倍以上稀释倍数仅供参考。按顺序在试管中加入各试剂, 进行测定, 为简化操作可取消保鲜膜封口, 沸水浴加热改为用