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氢氧化甲基汞琼脂糖凝胶电泳

实验分类:

RNA 实验

最新修订时间:

简介

氢氧化甲基汞和 RNA 中的尿嘧啶和鸟嘌呤上的亚胺键可发生反应,而这些键涉及到 Watson-Crick 碱基配对。因此,氢氧化甲基汞是一种有效的变性剂,能破坏 RNA 的二级结构.在氢氧化甲基汞存在时,RNA 的电泳迁移率是其分子质量的 1g 对数的反函数。由于氢氧化甲基汞可与丙烯酰胺聚合反应中所需的自由基发生反应,因此不能用于聚丙烯酰胺凝胶电泳,而只能用于琼脂糖凝胶电泳和蔗糖密度梯度离心。

来源:丁香实验

操作方法

氢氧化甲基汞琼脂糖凝胶电泳

(一)材料与设备 1) 水平电泳装置。 2) 水浴 3)4X 甲基汞凝胶电泳缓冲液:200 mmol/L 硼酸,20 mmool/LN2B4O7.H2O,40 mmol/LNa2S04(pH8.0) 4)2X 凝胶加样缓冲液: lmol/L 氢氧化甲基汞 25u1 4X 甲基汞凝胶电泳缓冲液 500ul 甘油 200ul 溴酚蓝

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