核转录分析

RNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

核转录 (runoff) 分析可以用于检测分离细胞核中特定基因的转录效率。进行核转录失控分析时，在体外将细胞核分离出来，然后在放射性同位素标记的核苷酸存在下进行转录，所合成的 KNA 均因掺入同位素而被标记，此混合 RNA 与固定在硝酸纤维素滤膜 h 的某一特定甚因的 DNA 探针杂交，就可以反映出该基因的转录狀态和转录速率。

来源：丁香实验

操作方法

核转录分析

一材料与设备 1)cDNA 2)PBS 3)NP-40 裂解缓：0.5%NP-40,10mmol/LTris-HCl(pH7.4)，3 mmol/LMgCl2,10 mmol/LNaCl 4)20XSSC:3mol/LNaCl,0.3mol/L 柠檬酸钠 (pH7)。 5)1mol/LNaOH 6) 甘油储存缓冲液：40% 甘油，50 mmol/L Tris-HCl (pH8.3) 0