cDNA 宏阵列方法分离拟南芥的臭氧应答基因实验

DNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

除 cDNA 微阵列外，基于尼龙膜支持物的 cDNA 宏阵列方法是又一被广泛应用的大规模基因表达数据的收集方法。从新基因的发现到基因表达谱的分析， cDNA 宏阵列被应用于分子生物学研究领域的各个方面。尽管 cDNA 宏阵列的点阵密度低于微阵列，但由于应用灵敏度较高的同位素标记的 cDNA 探针，宏阵列仍适用于检测大规模基因表达。在 mRNA 表达差异较大的器官中，比如植物分生组织和动物脑部， cDNA 宏阵列是获得基因表达谱的适用方法。本章将介绍 cDNA 宏阵列杂交的应用方法，内容包括：如何制备不同规模的宏阵列，如何分析实验结果，以及如何决定基因表达数据的统计学差异的显著性。
作者：马丁,本实验来自「环境基因组学实验指南」

来源：丁香实验

操作方法

cDNA宏阵列方法分离拟南芥的臭氧应答基因实验

##一、 cDNA 宏阵列的样品制备培养基： I : 2 (V7 V ) Gamborg B5 培养基（GibcoBRL， Rockville, MD), I : 1000(V /V ) Hyponex肥料（Hyponex 10 : 5 : 10; Hyponex Japan, Osaka， Japan), 1 % 鹿糖； pH调至 5. 7。 ##二、 cDNA宏阵列探针制备（见注