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应用 PCR 的遗传工程

实验分类:

DNA 实验

最新修订时间:

简介

本方案(由德克萨斯大学西南医学中心的 Andereson 提供)叙述在克隆化的哺乳动物 cDNA 的 5' 与 3' 端同时导入限制性内切核酸酶酶切位点,有时在此 cDNA 5' 末端,改变部分密码子为大肠杆菌的偏爱密码子等。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。

来源:丁香实验

操作方法

应用 PCR 的遗传工程

一、材料 1. 缓冲液和溶液 10X 扩增缓冲液 4 种 dNTP 贮存液(20 mmol/L, pH 8.0) 2. 酶与缓冲液 合适的限制性内切核酸酶 热稳定 DNA 聚合酶 3. 凝胶 琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶 4. 核苷酸与寡聚核苷酸 寡核苷酸引物 1 与引物 2 均溶于 TE ( 10 μmol/L, pH 8.0) 阳性对照 DNA 模板 DNA 5. 载体

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