核糖核酸酶保护(用核糖核酸酶和放射性标记的RNA探针对RNA作图)

DNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

核糖核酸酶保护分析用于度量特异性 mRNA 的丰度以及为它们的拓扑异构特征作图。这种方法包括测试 RNA 与互补的放射标记的 RNA 探针（核糖探针）杂交，然后未杂交的序列被一种或几种单链特异性的核糖核酸酶裂解。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。

来源：丁香实验

操作方法

核糖核酸酶保护(用核糖核酸酶和放射性标记的RNA探针对RNA作图)

一、材料 1. 缓冲液和溶液乙酸铵（10 mol/L） DTT ( 0.2 mol/L) 杂交缓冲液（用于 RNA)（40 mmol/L PIPES (pH 6.8)，1 mmol/L EDTA ( pH 8.0)，0.4 mol/L NaCl，80% 去离子甲酰胺，使用 PIPES 的二钠盐，用 1 mol/L 的盐酸调节 pH。）苯酚：氯仿（1:1，V/V） RNA 凝胶加样缓