碱性琼脂糖凝胶电泳

DNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

碱性琼脂糖凝胶电泳是在高 pH 条件下进行的，它能引起胸腺嘧啶和鸟嘌呤残基丢失一个质子，从而阻止与其各自的配对碱基-腺嘌呤和胞嘧啶间氢键的形成。变性的 DNA 保持单链状态，根据其分子大小在碱性琼脂糖凝胶中泳动。其他的变性剂如甲酰胺和尿素由于能引起琼脂糖橡胶化，因此结果往往较差。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。

来源：丁香实验

操作方法

碱性琼脂糖凝胶电泳

一、材料 1. 缓冲液和溶液琼脂糖 10X 碱性琼脂糖电泳缓冲液（500 mmol/L NaOH，10 mmol/L EDTA） 6X 碱性凝胶载样缓冲液（300 mmol/L NaOH，6 mmol/L EDTA，18% (m/V) Ficoll-400 ( Pharmacia 公司），0.15%（m/V) 溴甲酚绿，0.25% (m/V)二甲苯氰）乙醇溴化乙锭或 SYBR G