寡核苷酸 5' 末端磷酸化实验

DNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

以下介绍的是标记 10pmol 高比活度的寡核苷酸的反应，标记不同量的寡核苷酸可以通过增加或减少反应体积而保持各组分的相应浓度来实现。也可用类似的反应条件，将非放射性的磷酸加到用于定点突变的合成寡核苷酸 5'末端。本实验来源于分子克隆实验指南（第三版）上册，作者：黄培堂。

来源：丁香实验

操作方法

寡核苷酸5'末端磷酸化实验

材料缓冲液与溶液稀释贮存液至适当浓度 10XT4噬菌体多核苷酸激酶缓冲液 Tris-Cl(1mol/L,pH8.0) 酶和缓冲液 T4噬菌体多核苷酸激酶野生型T4噬菌体多核苷酸激酶是一种5‘磷酸转移酶和一种3'-磷酸酶(Depew and Cozarelli 1974;Sirotkin et al,1978)。而突变型酶（请见Cameron et al.1978)己失去磷酸酶活性而

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