GST 融合蛋白沉降实验

DNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

GST 沉降实验与 far western(方案 2) 相比有—个优点：探针蛋白是在更自然的环境下与可能的搭档蛋白孵育，因而增强了相互作用的有效性。本实验来源于分子克隆实验指南（第三版）下册，作者：〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。

来源：丁香实验

操作方法

GST 融合蛋白沉降技术检测蛋白质

材料缓冲液和溶液将缓冲液稀释到适当浓度。裂解缓冲液 20 mmol/LTris-Cl(pH8.0) 200 mml/L NaCl 1 mmol/L EDTA(pH8.0) 0.5% Nonidet P-40 使用前加入蛋白酶抑制剂达到下述终浓度：2ug/ul 抑肽酶（aprotinin)、1ug/ul 白胃素（leupeptin)、0.7ug/ml 胃酶抑素（pepstatin) 及 2