用噬菌粒载体制备单链 DNA

DNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

噬菌粒巧妙地组合了质粒和丝状噬菌体的特征。除了基本特征外，这些质粒通常是高拷贝数的，并带有一个修饰后的丝状噬菌体的主要基因间区。这个区域 ( 野生型为 508 bp)不表达蛋白，但含有全部的顺式作用序列，该作用是病毒 DNA 合成起始和结束及噬菌体颗粒的形态发生必不可少的。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。

来源：丁香实验

操作方法

用噬菌粒载体制备单链DNA

一、材料 1. 缓冲液和溶液卡那霉素（10 mg/ml) SDS 溶液（2%，m/V）蔗糖凝胶加样缓冲液 2. 凝胶琼脂糖凝胶（0.7%) 悬于 0.5 X TBE, 含 0.5 μg/ml 溴化乙锭 3. 培养基加富的 M9 基本培养基平板含 60 μg/ml 氨苄青霉素的 YT 琼脂平板 2 X YT 培养基含 60 μg/ml 氨芐青霉素的 2 X YT 培