λ 噬菌体臂的纯化（通过蔗糖密度梯度离心）实验

DNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

与插入型载体不同，置换型载体的基因组含有中部的填充片段，为了容纳外源 DNA 片段，填充片段必须被去除。该过程一般被称为“λ臂的制备”，包括用限制酶消化 λDNA 使两臂与填充片段分开以及随后的臂的纯化。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。

来源：丁香实验

操作方法

λ噬菌体臂的纯化（通过蔗糖密度梯度离心）实验

一、材料 1. 缓冲液和溶液 EDTA ( 0.5 mol/L，pH 8.0) 乙醇 MgCI2 (1 mol/L) 正丁醇乙酸钠（3 mol/L，pH 5.2) 蔗糖凝胶上样缓冲液 TE ( pH 7.6 和 pH 8.0) 2. 凝胶琼脂糖凝胶（0.5% 和 0.7%），用 0.5XTBE，含 0.5 μg/ml 溴化乙锭琼脂糖凝胶（0.5%，75 mm 厚），用