经双限制酶切割用作克隆载体的 λ 噬菌体 DNA 的制备实验

DNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

置换型载体（如 λ2001、λDASH、EMBL 系列、Charon 34、Charon 35 和 Charon 40 ) 含有一系列的限制位点，它们在中央填充片段的两端以相反方向排列（Frischaufet al. 1983）。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。

来源：丁香实验

操作方法

经双限制酶切割用作克隆载体的λ噬菌体DNA的制备实验

一、材料 1. 缓冲液和溶液 ATP ( 10 mmol/L) 氯仿乙醇酚：氯仿（1:1，V/V) 乙酸钠（3 mol/L，pH 5.2) 蔗糖凝胶上样缓冲液 TE ( pH 7.6 和 pH 8.0) 2. 酶和缓冲液噬菌体 T4 DNA 连接酶限制性内切核酸酶 3. 凝胶琼脂糖凝胶（0.7%)，用 0.5X TBE，含 0.5 μg/ml 溴化乙锭 4.