直链淀粉树脂亲和层析纯化麦芽糖结合融合蛋白实验

DNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

亲和层析方法几乎可以将麦芽糖结合融合蛋白纯化成单组分。麦芽糖结合蛋自（MBP) 是一个由大肠杆菌 malE 基因编码的周质蛋白，是细菌麦芽糖转运系统的成员之一。MBP 能结合微摩尔水平的麦芽糖和麦芽糊精，因此可用交联了麦芽糖的琼脂糖进行纯化。本实验来源于分子克隆实验指南（第三版）下册，作者：〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。

来源：丁香实验

操作方法

直链淀粉树脂亲和层析纯化麦芽糖结合融合蛋白实验

材料缓冲液和溶液贮存液、缓冲液和试剂的成分参见附录1。贮存液稀释至适当浓度。细胞裂解缓冲液（~150 ml) 30 mmol/LTris-Cl(pH7.l) 0.1 mmol/LEDTA 20%(m/V)蔗糖细胞洗涤缓冲液（~250 ml) 10 mmol/LTris-Cl(pH7.1) 30 mmol/LNaCl 柱洗脱缓冲液（~100 ml) 10 mmol/LTris-C