用λ噬菌体 PL 启动子在大肠杆菌中表达克隆基因实验

DNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

λ噬菌体 P_L启动子是受控于温度敏感阻抑物（cIts857) 的强效启动子，阻抑物可在低温下阻抑 P_L 启动子的转录，但在髙温下不能。因此带有λ噬菌体启动子的载体必须以带有 cIts857 基因的菌株作为宿主。本实验来源于分子克隆实验指南（第三版）下册，作者：〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。

来源：丁香实验

操作方法

用λ噬菌体 PL 启动子在大肠杆菌中表达克隆基因实验

材料缓冲液和溶液贮存液、缓冲液和试剂的成分参见附录 1。贮存液稀释至适当浓度。考马斯亮蓝染色溶液或银染溶液参见附录 8。 1XSDS 凝胶加样缓冲液不含 DTT 的 1xSDS 凝胶加样缓冲液室温保存，1mol/LDTT 贮存液现用现加于上述缓冲液。 L-色氨酸（10 mg/ml) 凝胶 SDS-聚丙烯酰胺凝胶（10%) 用于分离蛋白的 SDS-聚丙烯酰胺凝胶的制备参考附