用 IPTG 诱导启动子在大肠杆菌中表达克隆化基因实验

实验分类：

DNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

本方案将在疑难解析和诱导启动子表达蛋白的优化部分讨论影响质粒表达效率的因素。本实验来源于分子克隆实验指南（第三版）下册，作者：〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。

来源：丁香实验

操作方法

用 IPTG 诱导启动子在大肠杆菌中表达克隆化基因实验

材料缓冲液和溶液贮存液、缓冲液和试剂的成分参见附录 1。贮存液稀释至适当浓度。考马斯亮蓝染色溶液或银染溶液参见附录 8。 IPTG(1mol/L) 1XSDS 凝胶加样缓冲液不含 DTT 的 1xSDS 凝胶加样缓冲液室温保存，1mol/LDTT 贮存液现用现加于上述缓冲液。凝胶 SDS-聚丙烯酰胺凝胶（10%) 用于分离蛋白的 SDS 聚丙烯酰胺凝胶的制备参考附录 8