最新修订时间:
简介
本方案介绍如何从携带重组质粒的克隆中释放出 DNA 并将其固定于硝酸纤维滤膜或尼龙膜的方法,这一方法最初由 Grunstein 和 Hogness 使用。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。
来源:丁香实验
操作方法
一、材料 1. 缓冲液和溶剂 变性液,中和液,SDS (10%, m/V),2X SSPE。 2. 专用设备 (1) 处理滤膜用的玻璃或塑料托盘。 餐馆用的托盘就很理想,一次可操作直径 9〜10 cm 大小的 25 张滤膜。 (2) 微波炉,真空烤干箱(可达 80℃)或紫外交联装置。 (3) Whatman 3 MM 滤纸。 3. 载体和菌种 带有 E.coli 转化子克隆的滤膜