USE 诱变实验

DNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

本方法中，两条寡核苷酸引物杂交到变性重组质粒 DNA 双链的同一条链上。一条引物（诱变引物）携带一个拟引进靶 DNA 序列的突变，第二条引物携带一个能破坏质粒单一限制酶位点的突变。本实验来源于分子克隆实验指南（第三版）下册，作者：〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。

来源：丁香实验

操作方法

USE 诱变实验

材料缓冲液和溶液贮存液，缓冲液和试剂的成分请参阅附录 1。将贮存液稀释到合适的浓度。 10x 退火缓冲液 200 mmol/LTris-Cl(pH7.5) 100 mmol/LMgCl2 500 mmol/LNaCl 10X 合成缓冲液 100 mmol/L Tris-Cl (pH7-5) dTTP、dATP、dCTP、dGTP 每种浓度为 5 mmol/L 10 mmol/L