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制备和转化感受态大肠杆菌的Hanahan方法实验(高效的转化策略)

实验分类:

DNA 实验

最新修订时间:

简介

20 世纪 70 年代晚期和 80 年代早期,Dong Hanahan 在冷泉港实验室和哈佛大学做研究生的时候,他做出了以前从未听说过的转化效率,并且在以后他的方法被标准化了。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。

来源:丁香实验

操作方法

制备和转化感受态大肠杆菌的Hanahan方法实验(高效的转化策略)

一、材料 1. 缓冲液和溶液 (1) 甲亚砜 DMSO 二甲亚砜的氧化产物据推测为二甲硫醚,是转化的抑制物。 (2) DnD 溶液(DMSO 和 DTT) DTT(二硫苏糖醇)1.53 g,DMSO 9 ml,1 mol/L 乙酸钾(pH 7.5) 100 μl,H2O 补至 10 ml。 DnD 溶液用可耐受有机溶剂的 Millex SR 膜(Millipore) 过滤除菌,将 Dn

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