向平末端 DNA 连接合成接头实验

实验分类：

DNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

接头是指合成的能够自身互补的 DNA 片段，一般长 8~16 个核苷酸，互补的片段复性后可形成平末端的含有一个酶切位点的双链分子。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。

来源：丁香实验

操作方法

向平末端DNA连接合成接头实验

一、材料 1. 缓冲液和溶液乙酸胺（4 mol/L，pH 4.8)，ATP ( 5 mmol/L 和 10 mmol/L)（如果连接缓冲液中已有 ATP，则在步骤 2 中省去添加 5 mmol/L ATP），乙醇，10X 接头激酶缓冲液（600 mmol/L Tris-Cl ( pH 7.6），100 mmol/L MgCl2，100 mmol/L 二硫苏糖醇（DTT)，2 mg/ml 牛血