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向平末端 DNA 连接合成接头实验

实验分类:

DNA 实验

最新修订时间:

简介

接头是指合成的能够自身互补的 DNA 片段,一般长 8~16 个核苷酸,互补的片段复性后可形成平末端的含有一个酶切位点的双链分子。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。

来源:丁香实验

操作方法

向平末端DNA连接合成接头实验

一、材料 1. 缓冲液和溶液 乙酸胺(4 mol/L,pH 4.8),ATP ( 5 mmol/L 和 10 mmol/L)(如果连接缓冲液中已有 ATP,则在步骤 2 中省去添加 5 mmol/L ATP),乙醇,10X 接头激酶缓冲液(600 mmol/L Tris-Cl ( pH 7.6),100 mmol/L MgCl2,100 mmol/L 二硫苏糖醇(DTT),2 mg/ml 牛血

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