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简介
用小鼠L型成纤维细胞来进行条件优比的,但只需稍做修改即可适用于几乎任何细胞。根据所研究的细胞类型进行方法优化十分关键。
来源:丁香实验
操作方法
1. 接种约5×105小鼠L型成纤维细胞/10 cm培养皿,培养3天至30%~50%汇片。 2. 对每个待转染培养皿,用乙醇沉淀4 μg 待转染的质粒DNA,在组织培养橱中晾干沉淀,重悬于40 μl TBS中。 3. 吸去培养液,用10 ml 1×PBS洗涤培养皿,再用4 ml 完全DMEM-10NS洗1次。 4. 将DNA缓慢地(同时不断晃