噬菌体克隆的纯化实验

DNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

噬菌体是感染细菌、真菌、放线菌或螺旋体等微生物的细菌病毒的总称，作为病毒的一种，噬菌体具有病毒特有的一些特性：个体微小；不具有完整细胞结构；只含有单一核酸。噬菌体基因组含有许多个基因，但所有已知的噬菌体都是在细菌细胞中利用细菌的核糖体、蛋白质合成时所需的各种因子、各种氨基酸和能量产生系统来实现其自身的生长和增殖。

来源：丁香实验

操作方法

基本方案

1. 在直径82 mm LB平极上倒入含200 μl 宿主菌的3 ml 0.7%顶层琼脂糖，放置10 min。 2. 通过放射自显影胶片上的杂交斑点确定阳性噬斑在原平板上的位置，用牙签轻轻插入斑中。 3. 然后接种到步骤1制备的次级平板的顶层琼脂糖中，此牙签在平板上接连插30~40下。 4. 或用吸管插入阳性噬斑的位置，取一小块环形琼脂糖转入1 ml SM中。